T-RFLP-анализ микрофлоры кишечника — основа выбора кормовых добавок
для птицы
Г.Лаптев, И. Никонов, Л. Кряжевских, И. Егоров
2010-09-22
Рационы питания
высокопродуктивной птицы построены так, чтобы обеспечить максимально быстрый
рост за возможно короткий промежуток времени. Однако повышенная концентрация
питательных веществ в корме часто приводит к нарушению баланса микроорганизмов
в кишечнике и, соответственно, к возможному развитию условнопатогенной и
патогенной микрофлоры.
Для решения проблемы в настоящее
время применяют различные группы препаратов: кормовые антибиотики,
подкислители, пробиотики и пребиотики, кокцидиостатики и др. Также
антимикробным эффектом обладают фитобиотики и некоторые ароматизаторы. В связи
с огромным количеством предложений кормовых добавок отечественного и
зарубежного производства для птицевода возникает существенная проблема
рационального выбора, которую можно решить только с помощью максимально точного
и быстрого по затратам времени и средств анализа микрофлоры желудочно/кишечного
тракта птицы.
Одним из эффективных подходов к
определению микрофлоры является экспрессметод на основе T-RFLP-анализа. Он
основан на выделении ДНК, амплификации и секвенировании с последующим исследованием
полученных T-RFLP-грамм по базам данных с помощью программы «Fragment Sorter» и
комплексным анализом на основе статистических (корреляционный и кластерный),
таксономических и экологических подходов. Экспрессметод на основе
T-RFLP-анализа.
Апробация метода была проведена в
ходе производственного опыта на базе вивария Загорского ЭПХ ВНИТИП на
цыплятах-бройлерах кросса «Кобб Авиан 48», которым скармливали комбикорма,
сбалансированные как по валовому содержанию аминокислот (ОР1), так и с учётом
их доступности (ОР2). В рационы опытных вариантов добавляли ферментативный
пробиотик целлобактерин. Необходимо отметить, что аминокислотное питание —
ключевой показатель и требует нормирования не только общего количества протеина
в корме, но и отдельных аминокислот. У цыплят-бройлеров отбирали образцы желудочно-кишечного
тракта (тонкий кишечник, слепые отростки) и провели исследование содержимого
методом T-RFLP. Всего было выявлено 229 видов бактерий, относящихся к различным
таксономическим группам. Значительная часть представлена «uncultured»-видами,
являющимися в настоящее время некультивируемыми на существующих типах
питательных сред. Таксономический анализ не выявил возбудителей бактериальных
заболеваний ни в контрольных, ни в опытных вариантах.
Необходимо отметить, что на
формирование таксономической структуры микробиоценоза ЖКТ птицы существенное
влияние оказывает состав рациона. Обнаружены значительные различия в структуре
микробных сообществ контрольных и опытных вариантов. Целлобактерин воздействует
на соотношение доминирующих видов микроорганизмов. Применение данного
пробиотика на рационах, сбалансированных по аминокислотному питанию, приводит к
увеличению среднесуточных приростов с одновременным снижением затрат корма.
Изучено влияние микробного фона желудочнокишечного тракта птицы на метаболизм
20 незаменимых аминокислот и их усвоение. Численность доминирующих видов
бактерий коррелируется с использованием аминокислот организмом. Например,
наличие некоторых видов лактобацилл негативно действует на усвояемость лизина,
аспарагиновой кислоты и треонина. В то же время присутствие некультивируемых
видов положительно сказывается на усвояемости гистидина, а наличие
Fusobacterium — гистидина, лизина и пролина. Механизм влияния требует
дополнительного изучения.
Таким образом, экспресс-метод
определения микрофлоры на основе T-RFLP-анализа позволяет оценить влияние
различных компонентов рационов птицы на микробный фон и выявить взаимосвязи
между его составом, структурой и показателями продуктивности. Кроме того, он
перспективен для ранней диагностики бактериальных болезней. Поэтому с его
помощью можно осуществить рациональный выбор кормовых добавок для птицы.
Работа поддержана грантом РФФИ
№09/04/13768 – офи_ц.
Журнал - Птицеводство • №09 2010
|